方法开发手册|1.0|—液质工作原理 1-1
方法开发手册|1.0|—液质工作原理 1-1
方法开发手册|1.0|—液质工作原理 1-1
液相色谱-质谱(LC-MS)是一种将高效液相色谱的分离能力与质谱的检测优势相结合的技术。体现了色谱和质谱优势的互补,将色谱对复杂样品的高分离能力,与 MS 具有高选择性、高灵敏度及能够提供相对分子质量与结构信息的优点结合起来,在药物分析、食品分析和环境分析等许多领域得到了广泛的应用。
在学校实验室中我们几乎每天都会使用HPLC-UV。与MS检测器相比,除了设置正确的波长外,UV检测器不需要进行太多调整,也没有基质效应、源内裂解、检测器响应饱和等杂七杂八的问题。然而,当说到质谱检测时,还有非常多东西需要关注。
对于方法开发,每个可变动的参数都将带来一个可能对最终结果产生影响的变量。俗话说“巧妇难为无米之炊”。当第一次看到LC-MS方法时,对MS设置中各种简短的参数感到困惑,并且找不到一个好的指南来为初学者讲解所有内容。因此,我想详细地写下来,希望它能成为其小伙伴攀登方法开发“高山”第一步的好手册。在这个“小分子方法开发学习”手册中我们将教大家简单运用液质进行分析方法开发,并了解它们的工作原理。
样品通过进样系统进入离子源,由于结构性质的不同而电离为各种不同质荷比的分子离子和碎片离子,然后,离子碎片被加速进入质量分析器,不同的离子在质量分析器中被分离并按质荷比大小依次抵达检测器,经记录即得到按不同质荷比排列的离子质量谱图
质谱与其他的比如紫外检测器等一样充当的是检测器的角色
定性(确定物质是什么)、定量(测定物质的浓度)
医学、药学、环境、化学、生物学等
液质联用(LC-MS)又叫液相色谱-质谱联用技术,它以液相色谱作为分离系统,质谱为检测系统。样品通过液相色谱分离后的各个组分依次进入质谱检测器,各组分在离子源被电离,产生带有一定电荷、质量数不同的离子。不同离子在电磁场中的运动行为不同,采用质量分析器按不同质荷比(m/z)把离子分开,得到依质荷比顺序排列的质谱图。通过对质谱图的分析处理,可以得到样品的定性和定量结果。
LC-MS主要包括液相色谱系统、接口、离子源、质量分析器、检测器、真空系统、电气系统和数据处理等。
对于典型的LC-MS系统,完整的实体可分为四个基本组件(如图1所示):液相色谱仪、离子源、质量分析器和检测器。
- 液相色谱仪(由泵、柱温箱、自动进样器组成)将承担化合物分离的工作。
- 离子源用作在气相中产生带电物质的装置,用于目标分析物,用于后续质量分析。
- 质量分析器通过质荷比(m/z)过滤分析物离子和分析物离子片段。